Оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов

Этап 2 — Гормональная терапия

Следующий этап процедуры ЭКО начиняется на второй день менструального цикла и длится от 12 до 14 дней. Суть его состоит в том, чтобы при помощи гормональной терапии простимулировать работу яичников для получения 8–10 ооцитов, способных к оплодотворению. Именно такого количества будет достаточно для успешного проведения ЭКО.

Во время проведения гормональной терапии каждые четыре дня в обязательном порядке проводится УЗИ органов малого таза, в соответствии с результатами которого доктор может скорректировать дозировку препаратов.

Для проведения процедуры классического ЭКО может использоваться фолликулостимулирующий гормон гипофиза ФСГ, ионический гонадотропин и аналоги гонадолиберина. Врач назначает схему лечения в зависимости от протокола, который будет выбран для проведения ЭКО.

Международным научным сообществом одобрены разные протоколы стимуляции овуляции:

• Супердлинный — он длится 2–3 месяца;
• Ультракороткий — длится до 10 дней и предполагает высокие дозировки гормонов Обычно этот протокол назначается при таких диагнозах, как недостаточный фолликулярный резерв и низкий уровень гормона АМГ;
• Протокол ЭКО в естественном цикле — в этом случае не проводится гормональная стимуляция, и для оплодотворения берется одна яйцеклетка, которая созрела в естественном менструальном цикле;
• Протокол ЭКО с минимальной стимуляцией — для стимуляции используются небольшие дозы гормональных препаратов.

Чаще всего применяется короткий протокол, поскольку у женщины, нуждающиеся в экстракорпоральном оплодотворении, имеются серьезные проблемы с яичниками. В любом случае врач выберет для ЭКО наиболее безопасный для здоровья протокол. Очень часто вначале используют протокол ЭКО в естественном цикле, чтобы избежать гормональной нагрузки на организм, и только если этот метод не принесет результатов, назначается гормональная стимуляция.

Возможные последствия: мифы и реальность

Несмотря на то, что донорство яйцеклеток не является противозаконным и информация об условиях и этапах подготовки есть в открытом доступе, женщины-кандидаты беспокоятся, что донорство яйцеклеток отразится на их физическом состоянии. Где правда, а где вымысел, давайте разбираться.

Может ли донорство яйцеклеток привести к преждевременной менопаузе?

Нет, не может. Независимо от того, отдаст женщина яйцеклетки или они погибнут в естественном цикле, на срок наступления менопаузы это не повлияет.

Медицинский факт: природой в репродуктивную женскую систему заложен «запас» около 400 тысяч ооцитов, из которых созревает и пригодна к оплодотворению естественным путем только одна. Такого количества хватит на 300 лет природного цикла, так что помощь бесплодной паре не скажется на состоянии системы воспроизведения.

Этот же принцип распространяется на женщин, которые опасаются не иметь собственных детей, поскольку отдали яйцеклетки бесплодным парам. Не бойтесь, природного «запаса» генетического материала хватит для донорства и для собственной беременности.

Как отразиться на здоровье стимуляция гормональными препаратами?

При правильном расчете дозировки побочных эффектов не наблюдается. В том числе и «страшной» для женщин склонности к полноте. Возможны такие реакции как перепады настроения, небольшие головные боли, появление отечности конечностей, но такие проблемы возможны и без приема гормонов. Сразу после пункции яичников и нормализации цикла неприятные симптомы исчезают и не несут угрозы здоровью.

Что будет, если при донорстве яйцеклеток произойдет гиперстимуляция?

Риск гиперстимуляции действительно актуален. У женщины-донора может проявиться индивидуальная реакция на стимулирующие препараты, которая выражается слишком активной выработкой гормонов. Результат: отечность из-за задержки жидкостей в организме, возможно увеличение артериального давления, появление лишнего веса.

В 99,97% случаев синдром гиперстимуляции протекает легко и исчезает бесследно по окончании процесса овуляции. 0,03% пациенток с осложненной формой реакции госпитализируют, поскольку лечение требует медикаментозного воздействия и наблюдения врачей.

Когда падает овариальный резерв

Это происходит с 20 лет, и особенно значительное снижение количества яйцеклеток наблюдается с 30 лет. Но не стоит забывать, что  это индивидуальный вопрос. Тезис о том, что после 30 лет репродуктивная способность женщины резко падает, недавно был подорван американским психологом Жанной Твенге. Она утверждает, что эти данные взяты из устаревшей статистики, основанной на опросах совершенно другого, в плане психического развития, населения.

Сегодня женщины дольше физически активны, меньше курят и пользуются гораздо более современными медицинскими препаратами и технологиями. Они даже выглядят моложе! Твенге родила троих детей в возрасте старше 35 лет и поэтому считает, что между потенциалом рождаемости 20-летней и более зрелой женщины разница мала.

Это подтверждается исследованиями 2004 года, проведенными под руководством Дэвида Дансона.  У 770 европейских женщин проанализировали шансы забеременеть. Из участников в возрасте 27–34 лет 86% забеременели в течение года, а в возрастной группе 35–39 лет — 82%. По словам Жанны, это является доказательством того, что фертильность не падает так резко после тридцати лет, как предполагалось ранее. По мнению ученых,  гораздо большей проблемой при беременности являются эндометриоз и закупорка фаллопиевых труб.

От чего зависит овариальный резерв яичников

Яичниковый резерв в первую очередь связан с возрастом женщины. Чем она старше, тем меньше у нее яйцеклеток, поэтому шансы на оплодотворение уменьшаются.

Другие причины:

• Заболевания яичников, кисты, гинекологические операции. Если обнаружены кисты яичников, следует провести очень тщательную диагностику, поскольку большинство этих изменений не требуют хирургического вмешательства, а нуждаются в надлежащим образом выбранной фармакологической терапии. Хирургическое вмешательство связано с риском повреждения яичника или маточной трубы, что отрицательно влияет на резерв яичника.
• Курение.
• Отсутствие физической активности.
• Генетический или аутоиммунный сбой. На репродуктивную функцию влияют: гипотиреоз, возникший вследствие тиреоидита Хашимото, болезнь Аддисона, аутоиммунная или первичная недостаточность надпочечников, красная волчанка, ревматоидный артрит, сахарный диабет.
• Вирусные инфекции и их осложнения на репродуктивные органы.
• Химиотерапия, радиотерапия.

Химиотерапия

Что такое резерв яичников

Яичниковый резерв — это репродуктивный потенциал яичников — количество фолликулов, которые способны расти и превращаться в зрелую яйцеклетку.

Девочка рождается с определенным резервом яичников, который составляет около 1-2 млн. первичных клеток, которые в конечном итоге образуют ооциты. С каждым днем, а затем с каждым месячным циклом количество ооцитов только уменьшается.

Так в период полового созревания у девушки их остается уже 300-500 тысяч. Затем большинство оставшихся ооцитов рассасываются и в итоге остаются только 400-500 шт. 

Оставшиеся ооциты созревают под влиянием гормонального баланса. В каждом менструальном цикле один из них овулирует. Поэтому чем больше женщине лет, тем меньше шансов на зачатие.

Не так давно, 30-40 лет назад, большинство женщин рожали детей, когда им было всего восемнадцать-двадцать лет. Сегодня дело обстоит иначе. После окончания учебы женщина идет на работу, затем ориентируется на карьерный рост. Рождение детей становится второстепенной проблемой: «У меня еще есть для этого время», «Еще не готова, подумаю о малыше позже», – говорят современные бизнес-вумен. 

Для многих стало нормой создавать семью в возрасте тридцати лет, и только через несколько лет возникают мысли о беременности. Для многих пар это может быть слишком поздно — биологические часы тикают, и время не щадит никого…

Чем опасен диагноз

Для подготовки к ВРТ, конечно, достаточно и одной созревшей яйцеклетки, но наличие нескольких значительно увеличивает вероятность положительного результата беременности. Так, яйцеклетка может не «отреагировать» на введенный сперматозоид и не начать делиться, процесс деления может замедлиться или остановиться ввиду врожденных аномалий. Возможен риск патологичного развития, когда перенос эмбриона невозможен. Единственный эмбрион, даже если он пригоден к ЭКО, может не прижиться. В результате процедуру ВРТ придется пройти заново.

Учитывая, что каждая новая попытка экстракорпорального оплодотворения с пункцией яичников истощает и так не бесконечный запас репродуктивного материала, а стимуляция не совсем безвредный для организма процесс, с каждым протоколом шансы на успех могут снижаться. В таком случае целесообразнее рассмотреть возможность использования для ЭКО донорских яйцеклеток.

Диагностика

Единых диагностических мероприятий для выявления бедного ответа яичников не существует. Методов диагностики десятки и каждый специалист подбирает способы определения исходя из индивидуальных особенностей пациентки и собственного опыта. Независимо от особенностей        диагностики в клиниках, обязательными манипуляциями при подготовке к ЭКО являются:

• лабораторные исследования: определение концентрации эстрадиола, ингибина В, антимюллерова гормона;
• фолликулометрия (вагинальное УЗИ для отслеживания динамики роста фолликулов).

Немаловажную роль в диагностике играет техническое оснащение клиники. При наличии собственной лаборатории, специализирующейся на исследованиях в сфере репродуктивной гинекологии, и при наличии аппаратуры для тщательных осмотров, вероятность постановки точного диагноза (и, как следствие, наиболее эффективной схемы стимуляции) возрастает.

Этапы роста и развития эмбриона в процессе культивации

После оплодотворения зигота проходит ряд изменений, свидетельствующих о правильном развитии:

• на следующий день после оплодотворения клетка исследуется на наличие пронуклеусов — клеточных ядер родительских гамет. Наличие двух пронуклеусов (2PN) -нормальное оплодотоворение. Зиготы с нормальным оплодотворением отбираются и культивируются дальше. Если пронуклеусы не просматриваются под микроскопом, яйцеклетка считается не оплодотворенной (0PN). Аномальным оплодотворением считается наличие 3-х (ЗPN) и более пронуклеусов. Яйцеклетки не оплодотворенные и с анамальным оплодотворением не культивируются.
• во второй день развития эмбрион проходит 2 последовательных митотических деления дробления и, в норме, имеет 4 бластомера расположенных в форме тетраэдра, равных по размеру, одноядерных, без фрагментации (Grade 1) (по классификации 4A (цифра 4 обозначает количество бластомеров, буква А -бластомеры хорошего качества ), (Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryology, 2011)
• для 3-го дня развития оптимальным считается 8-клеточный эмбрион с равными по размеру, одноядерными бластомерами, без фрагментации. По международной классификации обозначение 8А (Grade 1)
• на четвертый день эмбрион формирует морулу, состоит из 12- 16 плотно прилегающих друг к другу бластомеров, начинается первая клеточная дифференциация: наружные клетки морулы в дальнейшем будут формировать трофэктодерму (ТЭ), внутренние клетки-внутреннюю клеточную массу (ВКМ) При естественной беременности на этой стадии происходит мигрирование морулы из маточных труб в матку.
• на пятый и шестой день предимплантационного развития эмбриона формируется бластоцита — сфера с внутренней полостью (бластоцель), выстланная рядом клеток трофэктодермы (трофобласт, из которого в дальнейшем формируются различные экстраэмбриональные структуры) и компактная группа клеток внутренней клеточной массы (эмбриобласт- клетки самого зародыша). Перенос бластоциты высокоэффективен, каждая вторая подсадка заканчивается беременностью.

Как регулировать качество ооцитов?

Качество ооцитов может оказать серьезное влияние на детородную функцию женщины и в том случае, если клетки оказываются ненадлежащего качества, есть вероятность, что пациентка может испытывать проблемы с зачатием. Улучшить качество ооцитов самостоятельно с помощью диет и народной медицины сложно, но возможно употребление специальных препаратов и лечение с помощью врачей

В случае, когда качество клеток очевидно располагает к репродуктивной дисфункции, врачи советуют обратить внимание на донацию ооцитов. В таком случае подбирается донор, соответствующий всем медицинским показаниям, который жертвует свои ооциты для успешного процесса зачатия и рождения здорового ребенка

В процессе планирования беременности и на ранних ее сроках гинеколог рекомендует употребление специальных витаминов. Чаще всего среди рекомендуемых препаратов оказывается рыбий жир и фолиевая кислота. Также показано употребление морепродуктов. Для успешного зачатия и отсутствия проблем при беременности необходимо исключить вредные привычки: употребление алкоголя и табака, крепкого кофе и чая. Врачи также рекомендуют соблюдать определенный режим дня, высыпаться, придерживаться рекомендованной диеты, избегать серьезных физических нагрузок и стрессовых ситуаций.

Беременным женщинам стоит помнить о том, что окислители любого вида могут привести к снижению качества ооцитов, а при появлении в яичниках активных форм кислорода есть вероятность нарушения процесса созревания яйцеклетки. Чтобы противодействовать этим процессам, можно употреблять медикаменты или продукты, содержащие мелатонин, так как этот гормон снижает окислительное воздействие на организм.

Фолликулы в яичниках

Внутри яичников происходит созревание ооцитов, готовых к оплодотворению сперматозоидами. Зачатие возможно только в случае их полноценного развития и дозревания. Часто гормональные нарушения приводят к появлению отклонений, пр овоцирующих образование кисты или бесплодие.

Основная задача фолликула заключается в защите ооцитов от разрушения и негативного влияния эндогенных факторов. Яйцеклетки, находящиеся в женских половых железах, еще недозревшие. Именно поэтому успешность зачатия и течение беременности во многом зависят от степени защиты ооцитов от влияния деструктивных факторов.

Этапы

Программа ЭКО состоит из нескольких этапов.

1. Первичный прием пациентки, обследование, постановка диагноза.
2. Стимуляция суперовуляции.
3. Получение ооцитов путем трансвагинальной пункции фолликулов яичников
4. Оплодотворение методом ЭКО или ИКСИ
5. Перенос эмбрионов

1. Первичный прием пациентки, обследование

Процедура ЭКО проводится амбулаторно и начинается с посещения специалиста гинеколога. Пройти такую консультацию в БИРЧ можно бесплатно.

Обычно женщина приходит с имеющимися у нее результатами обследований и диагнозами.

На первичном осмотре проводится ультразвуковое исследование, проверяется состояние матки, яичников. Иногда назначаются дополнительные обследования. Все это в итоге позволяет поставить окончательный диагноз для назначения процедуры ЭКО. 

Противопоказанием для проведения ЭКО является состояние женщины, при которых беременность и роды угрожают здоровью матери. Если таких ограничений нет, то пациентка переходит к следующему этапу подготовки – стимуляции супер овуляции.

2. Стимуляция суперовуляции

В нормальном менструальном цикле женщины созревает одна, максимум две яйцеклетки. Суперовуляция позволяет получить за один цикл большее количество яйцеклеток. Это необходимо для повышения вероятности зачатия.

Яйцеклетки (иначе ооциты) вызревают в организме женщины под воздействием половых гормонов. Половые гормоны могут вводиться и извне и, таким образом, осуществляется стимуляция суперовуляции в программе ЭКО.

В 3-4 день менструального цикла вводятся гормоны, которые вызывают рост большего чем в норме числа ооцитов. 

Созревание яйцеклеток отслеживается с помощью УЗИ.

В определенный день цикла, когда фолликулы достигают большого размера (мы их оцениваем как зрелые) вводится триггер овуляции и в среднем через 36 часов после введения этого препарата, который вызывает окончательное созревание яйцеклеток, производится трансвагинальная пункция яйцеклеток. 

Пункцию, то есть извлечение половых клеток, чаще всего проводят под анестезией, как правило, общей. Ход специальной иглы контролируют аппаратом УЗИ. При пункции происходит отсасывание фолликулярной жидкости, в которой содержатся яйцеклетки. Их отмывают и переносят в специальную посуду с питательной средой.

Если у пациентки отсутствуют яичники или наступила менопауза, не стоит отчаиваться – возможно, использование донорских яйцеклеток.

Что касается мужчин, то у них противопоказания для проведения ЭКО вообще отсутствуют. Сперму получают в день пункции яйцеклеток супруги. Так же возможно использование донорской семенной жидкости. Ее предварительно замораживают в жидком азоте. Такой метод хранения называется криоконсервацией.

4. Оплодотворение методом ЭКО или ИКСИ

Перед оплодотворением яйцеклетки сперматозоиды отделяют от семенной жидкости. Оплодотворение проводится врачами эмбриологами в лабораторных условиях. К яйцеклеткам в питательной среде добавляют сперматозоиды из расчетов более ста тысяч на одну половую клетку. И через несколько часов самый бойкий сперматозоид достигает цели.

При очень плохом качестве семенной жидкости (у мужчины имеется недостаточное количество сперматозоидов или они обладают плохой подвижностью) сперматозоид вводится в яйцеклетку вручную с помощью специального микрохирургического инструмента. Эта операция называется ИКСИ. Сперматазоиды проходят специальный отбор.  За тем сперматозоид при помощи тончайшей иглы внедряется в цитоплазму яйцеклетки.

После проникновения сперматозоида яйцеклетка считается эмбрионом. Он хранится в искусственных условиях от 2 до 5 дней. В специальных инкубаторах поддерживается температура 37 градусов и 7% влажность.

Неиспользованные эмбрионы подвергаются криозаморозке на случай повторных попыток.

На стадии инкубации эмбрионы исследуются. Это позволяет заранее выявить генетические отклонения.

5. Перенос эмбрионов

Наконец эмбрион переносят в матку. Делают это через специальный эластичный катетер. Процедура не требует анестезии и занимает несколько минут. Чтобы избежать многоплодной беременности при проведении ЭКО, женщине вводят не более 4 эмбрионов .

После переноса эмбрионов в матку роль врачей на этом заканчивается. По статистике, при проведении ЭКО шанс на успешное зачатие составляет 30 — 35 %.

Методы зачатия при низком качестве ооцитов

При плохих показателях анализа ооцитов врачи рекомендуют обратить внимание на альтернативные способы зачатия. Одним из популярных методов считается ЭКО – экстракорпоральное оплодотворение

В ходе процедуры проводят изъятие яйцеклетки из женского организма и ее оплодотворение, а затем ее подсаживают обратно.

Другим популярным способом является донорство ооцитов. В ходе этой процедуры здоровая женщина жертвует собственные ооциты, которые оплодотворяют спермой и перемещают в матку пациентки. Эта операция наиболее актуальна для женщин зрелого возраста, а также в тех случаях, когда свои яйцеклетки пациентки не обладают необходимыми качествами.

К донорству ооцитов прибегают в следующих случаях:

• Наличие проблем с яичниками;
• Пройденное ранее лечение радио- и химиотерапией, оказывающее влияние на формирование ооцитов;
• Наследственная предрасположенность к бесплодию;
• Неудачи при нескольких проведенных ЭКО.

Как и любая другая врачебная процедура и лечение, донация ооцитов имеет конкретные противопоказания, в числе которых онкология, психические отклонения и некоторые соматические заболевания, переносимые пациенткой.

Бесплатный прием репродуктолога
по 30 апреля 2021Осталось дней: 9

Уважаемые пациенты! Клиника «Центр ЭКО» приглашает вас на бесплатный прием репродуктолога с проведением УЗИ и составлением плана лечения.

Другие статьи

Программы ЭКО в регионах
Читать статью

Внимание! Важная информация о работе клиники

Уважаемые пациенты! Забота о вашем здоровье и безопасности – наш долг. «Центр ЭКО» предпринимает все необходимые меры для вашей защиты, в соответствии с рекомендациями Министерства Здравоохранения и Роспотребнадзора по предотвращению распространения вирусной инфекции.

Читать статью

Суррогатное материнство.

Суррогатное материнство — один из методов ВРТ, который применяется в тех случаях, когда женщина по состоянию здоровья не может выносить и родить ребенка. Еще тридцать лет назад единственным выходом в подобной ситуации было усыновление. В настоящее время бесплодие может быть успешно преодолено даже при отсутствии у женщины матки или при аномалии ее развития.

Суть программы заключается в том, что суррогатная мать вынашивает ребенка, который не имеет с ней генетического родства: эмбрион получают при помощи ЭКО, где яйцеклетки биологической матери оплодотворяются спермой биологического отца. После этого эмбрион переносится суррогатной маме в полость матки, которая по договору обязуется после рождения передать ребенка матери и отцу. Именно они и будут зарегистрированы в качестве юридических родителей малыша в органах ЗАГС.

Программа суррогатного материнства проводится по определенному алгоритму. Сначала необходимо найти суррогатную мать. Подходить к этому вопросу нужно со всей серьезностью. Каждая суррогатная мать должна пройти тщательное обследование, она должна быть полностью здоровой, психически нормальной, психологически адекватной и иметь возможность участия в программе в ближайшее время. 

Суррогатное материнство в России абсолютно легально и регулируется на основе действующего законодательства. Семейные пары обычно обращаются за помощью в специализированные центры, имеющие собственную базу данных обследованных женщин, которые полностью соответствуют требованиями Минздрава РФ и готовы немедленно вступить в программу. Между заменяющей матерью и биологическими родителями заключается договор, который содержит обязательства сторон и составляется юристами применительно к каждой конкретной ситуации. Обычно специалисты клиник ЭКО решают все вопросы, связанные с юридическим сопровождением процедуры, вплоть до момента регистрации ребенка в органах ЗАГС.

Ооциты разного порядка

Врачи выделяют ооциты первого и второго порядка.К первому виду относятся те клетки, которые прошли необходимые митотические деления и приобрели необходимое количество питательных веществ. Большее число этих клеток не задействовано в процессе мейоза и только около 400 или 500 клеток участвует в нем, готовясь к потенциальному оплодотворению. Находясь в утробе матери, на третьем месяце развития в организме младенца женского пола формируется достаточное количество ооцитов первого порядка, которые сохраняются до начала полового созревания в подростковом возрасте.

В момент наступления полового созревания 1 раз в течение каждого месяца в середине цикла количество ооцитов возрастает ввиду воздействия гормонов, находящихся в яичниках. Все они располагаются в фолликулах. В ходе процесса мейоза появляются ооциты второго порядка. Второе деление ведет к образованию зрелой яйцеклетки. Учитывая, что в начале процесса в нем участвует множество клеток, все стадия деления от начала до финала проходит только одна.

Именно этот фолликул развивается быстрыми темпами и в конкретный момент лопается, выпуская из себя ооцит второго порядка. Если в течение суток ооцит успевает пройти процесс оплодотворения сперматозоидом, процесс завершается, а, если этого не происходит, ооцит дегенерирует.

Ооциты второго порядка образуются из клеток первого порядка, которые хранятся в женском организме большое количество лет. За длительный период в яйцеклетке могут произойти разрушительные изменения, которые в свою очередь могут мотивировать генетическую патологию у детей, рожденных матерями в возрасте старше 40 лет. Дефекты яйцеклетки проявляются в различных отклонениях. Одним из самых известных является синдром Дауна, которым страдает около 1% поздно рожденных детей. Причиной заболевания становится трисомия в 21й хромосоме, а точнее, некорректное деление ооцита в ходе мейоза первого порядка.

Низкий запас яичников и вероятность беременности

Низкий резерв яичников не исключает материнства, но указывает на то, что времени на беременность становится все меньше и меньше, поэтому вам следует «мобилизоваться» и срочно озадачиться зачатием.

Если забеременеть не получается, нужно срочно обратиться к гинекологу и начать лечение. Например, назначаются: циклические наблюдения с попытками зачатия строго во время овуляции, стимуляция овуляции с попытками наступления естественной беременности, внутриматочная инсеминация.

Низкий резерв яичников также может означать плохую реакцию яичников на стимуляцию лекарственными средствами. В этом случае придется рассмотреть возможность экстракорпорального оплодотворения или замораживания яйцеклеток для дальнейшего ЭКО.